【光谱实验室：程园 撰文】

【仪器设备：快速成像显微拉曼光谱仪 WITec Alpha300R】

【地点：4号楼220室 光谱实验室】

1.安装透射物镜：取下样品台，透射物镜安装在样品台下面，再装上样品台。

2.选择透射模式：在软件中的主菜单最上面一栏【Configurations】中下拉至【Raman】选【HAL Transmission CCD1】。

3.样品台中心位置校正：显微镜光路上旋转滤光器至激光位置，软件上【Laser Control】选择对应激光，点击【Top】，打开激光，点击，选【Go to Calibration Position】，样品台移动到最边缘位置，再点击，点击【Move Sample to Absolute Position】，样品台移动到中心位置，激光从样品台的小孔中心穿过。

激光光路选择

样品台中心位置校正

4.【TOP】反射物镜聚焦：放上样品，将激光聚焦成最小最亮的点，且在圆圈位置，聚焦好后关闭激光。

反射物镜聚焦

5.【Bottom】透射物镜聚焦：打开激光，先用一张白纸放在透射光路中，手动调节透射物镜的高度，使激光的光斑最小。然后，软件中点击【Bottom】，点击【Additional】,此时手柄控制透射物镜(Inverted Objective)的移动，保持激光打开，将激光聚焦成最小最亮的点，且在圆圈位置（若位置偏移太大需要重新移到小孔中心）。聚焦好后关闭激光，【Laser Control】选择【NO Laser】关闭激光，对应设备上滤光器位置旋转到空白关闭激光。

透射物镜 (Inverted Objective)聚焦

白光光路选择

6.打开白光光源，温度调节至3400 K，手动打开白光光路，移到BF处，点击设置透射物镜(Inverted Objective)处光强【Bottom Illumination [%]】。

白光灯与亮度调节

7.透射测试需要在光谱拼接模式下测试，首先，在【Spectrograph1】的【Grating】选择300g/mm，【Spectral unit】改为nm。然后【Spectral Stitching】设置测试条件：【Integration Time】和【Number of Accumulation】根据测试设置，【Start/stop position】设置为白光全波长【400-850nm，有效区域为500-760nm】，点击【Start Stitching】开始测试，先测试空白基底，计为X1，然后进行样品测试。

光谱拼接模式条件设置

8.如果空白和样品厚度不一样，样品测试需要重复上述的聚焦过程，其他测试条件保持与空白一样，数据计为X2。

9.同时选中X1，X2数据，下拉选择【Calc】，Result=X2/X1，点击Extract得透过率数据。

透过率数据处理